中药分析中使用的柱色谱与中药化学中的经典柱色谱有什么异同?
中药分析中用于净化样品的柱色谱与中药化学中经典柱色谱的异同:经典液相色谱使用粗多孔固定相,填充在大直径长玻璃柱管中,流动相仅依靠重力流过柱,因此固定相中溶质的传质扩散速度慢,柱入口压力低,柱效低,分析时间长。
气相色谱和液相色谱都是通过停留时间来定性的。由于样品中各组分的沸点、极性或吸附性质不同,各组分往往会在流动相和固定相之间形成分配或吸附平衡。
由于载气/流动相的流动,样品组分在移动过程中反复分布或吸附/解吸。结果,载气/流动相中浓度高的组分首先流出色谱柱,浓度高的组分在固定相中分配后流出。
吸附剂的填充
将吸附剂干加入色谱柱一次,振动管壁使其均匀下沉,然后沿管壁缓慢加入洗脱液;或者在色谱柱下端出口处连接一个活塞,加入适量的洗脱液,拧开活塞使洗脱液慢慢滴出,然后从管顶慢慢加入吸附剂,使其均匀润湿下沉,在管内形成弹性适中的吸附层。在操作过程中,吸附层上应保持足够的洗脱液。