无土种植金线莲

金线莲是兰科金线莲属多年生草本植物。、别名金蚕、金线莲等。，产于福建、浙江、江西、湖南、广东、海南、广西、四川、云南及西藏东南部[65438+。金线莲作为一种稀有珍贵的中药材，有“药用植物之王”的美誉，在民间被称为“金草”、“神药”、“黑参”。常用于治疗小儿惊风、高热、糖尿病、高血压、肝炎、肾炎。在浙江、福建、台湾省等省及东南亚地区，被视为珍稀药材，被称为“药王”[3-5]。金线莲对生态条件要求严格，储量很少，自身植株矮小(仅4 ~ 18 cm高，茎粗0.5~2.0 mm)，根系不发达，生长发育缓慢，使得金线莲更加稀有[6]。此外，近年来，自然环境遭到严重破坏，尤其是野生资源，大量人员长期采挖，以及生态环境遭到破坏，我国野生金线莲几乎灭绝[7-8]。此外，野生金线莲种子较小，无胚乳，自然条件下发芽率极低，但扦插繁殖速度较慢，因此在金线莲工厂化育苗过程中，主要通过组织培养进行繁殖。金线莲的组织培养和育苗技术已经非常成熟，相关研究也已经比较系统和全面。摘要:对金线莲组织培养和快速繁殖的研究进行了综述，包括无菌体系的建立、增殖培养、生根培养和炼苗移栽，以期为该领域的研究人员提供参考。

1无菌培养物建立的研究

在金线莲的组织培养过程中，整个植株都可以作为外植体，包括茎段、顶芽、叶片、种子等。，但不同类型的外植体在其启动时会表现出一定的差异，并对下一步增殖有一定的影响。王亚英等人以金线莲的茎段、叶片和不定芽为材料，比较了三种外植体对愈伤组织诱导的影响。结果表明，三种外植体都能成功诱导出愈伤组织，但不定芽是诱导愈伤组织的最佳外植体[9]。冯以金线莲无菌苗的幼叶为外植体，发现叶片的愈伤组织诱导率极低，且分化期长，后期难以形成不定芽。而利用茎段(切成约2 mm厚的小块)诱导率达60%以上，培养周期短，适合规模化生产，是金线莲快速繁殖的最佳选择[10]此外，金线莲种子也可作为组织培养的外植体。张铁使用的云南金线莲种子在不含激素的Hyponex 1培养基上有较好的萌发率，原球茎在添加10%椰子汁[11]后能分化出壮苗。黄惠莲以Knudson C为基本培养基进行金线莲种子发芽试验，其种子发芽率也能达到60%[12]。因此，从以上结果可以看出，以金线莲的种子、叶片和茎段为外植体，成功建立了金线莲的无菌体系，同时也可以在后期发育成苗。但在大规模生产金线莲幼苗的过程中，金线莲的顶芽和茎是最好的外植体材料，容易启动，增殖迅速，能保持育成的幼苗具有更一致的遗传性状[65438

2扩散研究

兰花常见的增殖方式有原球茎增殖、丛生芽增殖、不定芽增殖等。，但不同的增殖方式也受不同因素的影响，其增殖过程主要受激素类型、培养基类型、外植体类型等影响。金线莲种子萌发后形成原球茎，原球茎可直接发育成苗，也可由原球茎产生愈伤组织，再由愈伤组织发育成类原球茎分化成苗，通过类原球茎实现大量增殖[15]。同时，金线莲还可以通过茎段或顶芽形成不定芽，以丛生芽的形式增殖。黄惠莲等从金线莲种子萌发原球茎，在Knudson C培养基中添加0.5 mg/L的6-BA和20%的马铃薯提取液，成苗率可达51%[12]。另外，杨白云比较了TDZ、NAA、S-3307(烯效唑)三种植物生长调节剂对原球茎分化的影响，结果为TDZ >；S-3307(稀释的三唑)>:NAA[16].而刘等人以野生金线莲的茎段为外植体，在MS基本培养基中添加6-BA 1.0 mg/L、0.1 mg/L、0.02 mg/L，芽的诱导率最高，达95.92%。但在营养分化期间，宜使用低浓度激素组合，有利于促进芽径增厚和茎叶分化[17]。郝丽丽等人在腋芽增殖过程中发现，金线莲对6-BA不敏感，但在培养过程中有一定的积累效应，其中ZT的增殖效果最好[18]。高燕等人还发现金线莲对6-BA不敏感。当培养基中6-BA的浓度达到4 mg/L时，仍然没有出现异常苗，但在培养过程中6-BA会积累，在继代培养中加入一定量的KT可以促进芽的分化和增殖[19]。当吴等将6-BA的剂量增加到5.0 mg/L时，芽的增殖倍数最大，但芽开始明显老化，节间变短[20]。孟等人对6-BA、KT和进行了比较，但发现6-BA的增殖作用强于KT和。6-BA诱导的芽健壮，节间短，KT诱导的节间长，ZT诱导的节间和效应居中[21]。关于不同培养基对金线莲增殖的影响，曹天旭发现，在VW和KC培养基中，金线莲分化芽的数量明显高于MS和B5培养基，但芽的质量相对较差，成苗率仅为4.6%(VW)和65，438+04.3% (KC)，而在B5培养基中，虽然仅形成65，438+05.9个芽，但芽的质量较差。B5和MS培养基中的株高高于VW和KC培养基中的株高[22]。另外，在相同的培养基下，由于金线莲启动时选择的外植体不同，在丛生芽的诱导阶段和增殖阶段效果会有较大差异。宋等人以金线莲的茎节为外植体进行增殖培养，增殖系数为4.8。以茎尖为外植体进行增殖培养，增殖系数为2.7，茎节诱导丛生芽的效率明显高于茎尖[23]。