中草药中植物蛋白的基本提取方法

1，在液氮中研磨叶片

2.加入3倍体积的样品，在-20℃过夜，然后离心(4℃以上8000rpm，4℃下65438±0小时)，弃去上清液。

3.加入等体积的冰浴丙酮(含0.07%β-巯基乙醇)，摇匀，离心(4℃8000rpm以上，4℃65438±0小时)，将沉淀物真空干燥备用。

4.上样前，加入裂解液，室温静置30分钟，使蛋白充分溶解在裂解液中，然后离心(65438±05℃，8000 rpm，65438±0小时或更长，以无沉淀为准)，4℃暂存备用。

5.用Brandford法对蛋白质进行定量，然后包装，置于-80℃下备用。

药物:

提取物:含65438±00% TCA和0.07%β-巯基乙醇的丙酮。

裂解物:将2.7g尿素和0.2gCHAPS溶于3ml灭菌去离子水中(最终体积为5ml)，使用前加入1M DTT65ul/ml。

这种方法针对双向电泳的特点，杂质少，离子浓度低！当然单向电泳也适用，但是电泳的条带会减少！