中药中栀子苷的纯化

方法名称:石湾牛黄清心丸-栀子苷-高效液相色谱法适用范围:本方法采用高效液相色谱法测定石湾牛黄清心丸中栀子苷的含量。本方法适用于石湾牛黄清心丸。方法原理:样品加入甲醇超声处理，过滤，HPLC分离，紫外吸收检测器在238nm波长处检测栀子苷的吸收值，计算其含量。试剂:1。甲醇(色谱纯度)2。乙腈(色谱纯度)3。水是蒸馏水4。京尼平苷对照品(中国药品生物制品检定所)仪器设备:1仪器1.1 HPLC仪器1.2色谱柱十八烷基硅胶键合硅胶为填充剂。1.3可变波长紫外检测器1.4色谱工作站1.5超声波发生器2色谱条件2.1流动相:甲醇+乙腈= 10+902.2流速:1.0ml/ Min 2.3检测波长:238nm 2.4柱温:室温样品制备:1。对照品溶液的制备取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每毫升含0.298毫克的溶液，即得对照品溶液。准确量取栀子苷对照溶液0.5ml、1.0 ml、1.5 ml、2.0 ml、2.5ml，分别置于5ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。2.供试品溶液的制备取本品10g，研细，过20目筛，准确称取约1.2g，置于50mL带塞锥形瓶中，加入甲醇25mL，塞紧，称量。超声波处理20min，冷却至室温，再次称重，加入甲醇补足损失的重量，摇匀。准确量取10mL溶液，置于25mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)过滤，即得供试品溶液。操作步骤:1。标准曲线的制备。准确吸取20ul，注入液相色谱仪，测量峰面积，以样品体积X为横坐标，峰面积Y为纵坐标，绘制标准曲线。回归方程为:y = 494747 x-1511.3，r=0。9997(n=5)，线性范围为0.596-2.980毫克。供试品的测定:取供试品溶液20μL，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，用外标法计算栀子苷的含量。注:“精确称量”是指称量要精确到称量的千分之一。“精密测量”是指测量体积的精度应满足国家标准中体积移液管的精度要求。