实时RT-PCR是什么意思?

Mbth实时定量聚合链反应

实时荧光定量多核苷酸链式反应

实时荧光定量PCR

外文缩写RT PCR

实时荧光定量PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

PCR(定量实时PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增中用荧光化学物质测量聚合酶链式反应(PCR)每个循环后产物总量的方法。用内参法或外参法对待测样品中特定的DNA序列进行定量分析。

Real-timePCR是通过PCR扩增过程中的荧光信号实时检测PCR的进展。在PCR扩增的指数期,模板的Ct值与模板的初始拷贝数之间存在线性关系,因此成为定量依据。

专有技术

将荧光素标记的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性、低温复性、适当温度延伸的热循环,与模板DNA互补的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发荧光。随着循环次数的增加,扩增的目的基因片段呈指数增加。通过实时检测相应的随扩增而变化的荧光信号强度,可以得到Ct值,同时用几个已知模板浓度的标准样品作为对照,可以得到待测样品的目的基因的拷贝数。