核苷的药物分析

用途:该方法采用高效毛细管电泳测定四味灵芝液中腺苷和鸟苷的含量。

该方法适用于四维灵芝液体。

方法原理:取样品，离心上清液，加到处理过的大孔吸附树脂上，依次用水和30%乙醇洗脱，收集30%乙醇部分，水浴蒸干，残渣用水定容，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，将滤液作为供试品溶液注入高效毛细管电泳仪进行电泳分离，用紫外检测器检测腺苷和鸟苷的相应值，进行计算。

试剂:1。乙醇

2.硼砂

3.十二烷基磺酸钠

仪器设备:1台仪器

1.1高效毛细管电泳仪

1.2熔融应时毛细管柱(75μm×57cm，有效柱长50cm)

1.3紫外线检测器

2分离条件

2.1运行缓冲液:20 mol/L硼砂(含30mmol/LSDS，pH 10.0) 95%乙醇= 95.5。

2.2气动取样:20psi，15s。

2.3柱温:20℃

2.4检测波长:254纳米

样品制备:1。称量测试样品。

精确量取20毫升四维灵芝液体。

2.参考储备溶液的制备

准确称取适量腺苷和鸟苷，以水为溶剂，配制成浓度为0.1mg/L/L的对照储备液

3.内标溶液的制备

准确称取适量磺胺甲恶唑作为内标，以水为溶剂，配制浓度为0.2 mg/L的内标溶液

4.标准溶液的制备

准确吸取0.1，0.3，0.5，0.7，1.0，2.0mL对照储备液，置于5mL容量瓶中，加入1mL内标，加水至刻度，摇匀，得到系列浓度的标准溶液。

5.测试溶液的制备

取供试品，离心上清液，加到处理过的大孔吸附树脂柱(1.5×11cm)上，依次用50毫升水和100毫升30%乙醇洗脱，收集30%乙醇，水浴蒸干，残渣转移至5毫升容量瓶中，用水溶解。

注:“精确称量”是指称量应精确到所取重量的千分之一。“精密测量”是指测量体积的精度应满足国家标准中体积移液管的精度要求。

操作步骤:1。绘制标准曲线。

将上述系列浓度标准溶液注入高效毛细管电泳仪进行电泳分离，用紫外检测器检测，检测波长为254nm。将腺苷和鸟苷的浓度绘制为峰面积与内标峰面积之比的标准曲线，并通过线性回归获得回归方程。

2.试验品的测定

将上述供试品溶液注入高效毛细管电泳仪进行电泳分离，用紫外检测器检测，检测波长为254nm。记录腺苷和鸟苷的相应值，并计算它们的含量。