总糖和还原糖的提取、分离和纯化方法有哪些？
还原糖含量用滴定法和薄膜滴定法测定。总糖含量和还原糖含量的区别是多糖的含量。三种方法测得的桔梗多糖含量分别为95.55%，96.065438±0%，
95.75%。结果表明，三种方法测定值相近，但综合考虑实验成本、设备、操作及影响测定的因素，选择蒽酮-硫酸法结合DNS法测定桔梗
含糖量。
2.采用传统的水煮醇沉法提取桔梗多糖。分别考察了提取温度、提取时间、料液比和提取次数对提取率的影响。在单因素实验的基础上，采用四因素三水平。
通过正交试验优化桔梗多糖的提取工艺。正交试验结果表明，桔梗多糖的最佳提取条件为:提取温度80℃，提取时间2h，提取次数2次，料液比为2。
1:25。通过三次平行验证实验，该方案下桔梗多糖的提取率为42.55438+0%。
3.分别采用Sevag法、三氯乙酸法和三氯乙酸-正丁醇法对桔梗多糖的脱蛋白进行了研究。结果表明，Sevag被用作蛋白质去除率和多糖损失率的量度。
脱蛋白效果好，工艺条件为:多糖:氯仿:正丁醇= 25: 5: 1，剧烈震荡20min。脱色方法为H2O2氧化，脱色条件为:多糖。
溶液:H2O2 = 4: 1，用浓氨水或0.1%NaOH调节pH值至8.8，37℃保温12h。Sephadex G-25柱层析用于脱盐和小分子物质。
4.用DEAE-纤维素52分离纯化桔梗多糖，得到三个主要组分:PGPN、PGPA1和PGPA3。三种成分通过葡聚糖凝胶
通过G-100柱色谱进一步分离后，获得单一对称的洗脱峰。使用葡聚糖凝胶
通过G-100柱层析、旋光度和紫外分光光度法对三种多糖的纯度进行鉴定，发现三种多糖均一，不含蛋白质和核酸。使用葡聚糖凝胶
G-200柱层析测得三种多糖的分子量分别为10233、4677和23442。
5.采用薄层色谱法分析桔梗多糖的单糖组成。TLC图谱显示PGPN的单糖组成含有果糖、葡萄糖和半乳糖，或两者皆有。
有；PGPA1由半乳糖和果糖组成；PGPA3由半乳糖和木糖组成。红外光谱表明PGPN的单糖组成为呋喃糖和吡喃糖。PGPA1的单糖
也由呋喃糖和吡喃糖组成。PGPA3的单糖由吡喃糖组成，糖苷键类型为α型，可能含有β型糖苷键。1H-NMR谱显示PGPN的糖苷键。
所有类型均为α型，PGPA1的糖苷键类型为β型；PGPA3的糖苷键类型既有α型也有β型。