2017执业药师药物分析注意事项:甾体激素分析

掌握醋酸地塞米松及其制剂、丙酸睾酮、黄体酮、炔雌醇及其制剂的鉴别、杂质检查和含量测定方法。

基本结构和分类

天然和合成的类固醇激素都有环戊烷并菲母核。分为肾上腺皮质激素、雄激素和蛋白质合成代谢类固醇、孕酮、雌激素等。

1.肾上腺皮质激素

结构特征:有21个C原子；一枚戒指，带着？4-3-酮；C17，是吗？-醇酮基，而且大部分都是？-羟基；C10，C13，带角蛋白；C11，带有羟基或酮基；其他的，有些皮质类固醇有？1,6?、9?卤素，16？羟基，6？、12?、16?、16?甲基等。

2.雄激素和蛋白质合成代谢类固醇

例如甲基睾丸酮、丙酸睾丸酮和十一酸睾丸酮；蛋白同化类固醇有去甲丙酸苯酯。

结构特征:雄核母核有19个C原子；蛋白质的合成代谢类固醇母核有18个C原子(C10上没有角蛋白)；一枚戒指，带着？4-3-酮；C17，无侧链，大部分是一个？-羟基，有些是它们形成的酯类，有些有？甲基。

3.孕酮

中国药典包括:黄体酮、醋酸甲羟孕酮、己酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮原料及制剂；醋酸氯地孕酮原料等。

结构特征:有21个C原子；一枚戒指，带着？4-3-酮；C17，带有酮基，其他，一些带有？6,6?甲基，6？甲基，6？氯。

4.雌激素

包括:雌二醇和炔雌醇的原料，苯甲酸雌二醇、戊酸雌二醇和炔雌醇的原料和制剂。

结构特征:18个C原子；环a是苯环；C3具有酚羟基，其中一些形成酯或醚；C10，无角蛋白；C17，是吗？-羟基或酮基，其中一些形成酯，另一些具有乙炔基。

第一节醋酸地塞米松及其制剂的分析

一.身份识别

1.与碱性酒石酸铜试液C17-？-醇的酮基可还原，产生橙红色氧化亚铜沉淀。

2.与硫酸反应，在碱性条件下水解生成乙酸，在硫酸存在下与乙醇反应，有乙酸乙酯的香气。

3.有机氟化物经活性氧瓶燃烧法破坏后，在醋酸-醋酸钠缓冲液中与茜素氟化蓝和硝酸铈形成蓝紫色络合物。

4.红外线分光镜

二、特殊杂质检查

1.其它类固醇薄层色谱高、低浓度对比法，用碱性四氮唑蓝试液作显色剂。

2.硒的吸收量按药典附录硒检查法测定，限量为0.005%。

三、含量测定

1.原料含量测定采用高效液相色谱法，含量计算采用内标法以峰面积计算。

2.采用紫外分光光度法和吸收系数法计算片剂含量。

3.注射用四唑比色法

主要皮质类固醇C17-？-酮醇基是可还原的，四唑盐在强碱溶液中可定量还原为有色甲。氯化三苯基四氮唑(简称TTC)，其还原产物为不溶于水的深红色三苯基次甲基。最大值在485纳米。

测定方法分别准确量取65，438+0ml对照溶液和供试品溶液，置于带塞的干燥试管中，加9ml无水乙醇和65，438+0ml氯化三苯基四氮唑试液至各精密，摇匀，然后准确氢化氧化四甲铵试液至65，438+0ml，摇匀，置于25℃暗处40~50min，于485℃用分光光度法测定。

该方法广泛用于皮质类固醇的测定，但反应速度、显色强度和稳定性受结构、溶剂、显色温度和时间、水分、碱浓度和空气中氧气的影响。

(1)溶剂和水分的影响:小于5%无影响，较大时显色速度变慢，采用无醛溶剂。

(2)碱的种类和加入顺序的影响:四甲基氢氧化铵较好，常用。但有研究表明，与氢氧化四甲铵长时间(24小时)接触后，皮质类固醇会部分分解，所以最好先加入四氮唑盐溶液，再加入碱溶液。

(3)空气中氧和光的影响:反应及其产物对光敏感，需用避光容器，置于暗处显色，同时达到最大显色时间后立即测定吸光度。

(4)温度和时间的影响:温度升高，显色速度加快。一般在室温或30℃恒温下显色，容易得到重线性的好结果。中国药典大多在25℃避光反应40~45min。