如何辨别假五味子

2.鉴别方法2.1性状鉴别五味子为不规则球形或扁圆形，表面直径5 ~ 8 mm红色、紫色或暗红色，有皱纹，凹凸不平，有油性:部分表面暗红色或出现“白霜”。果肉柔软，1 ~ 2粒，肾形，长4 ~ 5毫米，表面褐色，光滑有光泽；种皮薄而脆，种脐在一侧，明显凹陷，颜色较深；剥去种皮，看到微黄的胚乳，角质油状，一端有小胚。种子破碎后有香味，酸甜苦辣，微苦。华中五味子为球形或扁圆形，直径4 ~ 6 mm，表面棕红色至暗褐色，皱缩皱缩。果肉经常粘在种子上，有时会有轻微的白霜。内含1 ~ 2粒种子，肾形，直径3 ~ 4毫米，表面黄褐色，略粗糙有光泽，种皮薄而脆。种脐在一侧，略凹，有粗糙的脊和疣状突起；胚乳富含油脂，胚小，位于一端。果肉微气，微酸。两者的主要鉴别点是:五味子表面红、紫、枯、油、软；华中五味子，表面棕红色至黑褐色，皱缩干瘪，果肉紧贴种子。2.2显微鉴定表明五味子粉末呈深紫色，种皮表皮石细胞表面呈多角形或长多角形，壁厚，有极细的孔和沟，细胞腔内有暗褐色物质；种皮内层的石细胞呈多边形、圆形或不规则形，壁稍厚，凹坑较大。果皮表皮细胞表面呈多边形，纵壁呈串珠状增厚，表面有角质纹，表皮内散在油细胞。中果皮细胞皱缩，内含暗褐色物质和淀粉粒，圆形或多角形，单粒球形，复粒由2-6个亚粒组成，可见脐点。五味子粉末为深棕色。种皮表皮石细胞表面观为多边形或长多边形，壁厚，孔和沟密集，细胞腔内有褐色物质；种皮表皮石细胞纵切面呈长方形，外侧壁无突起，比内壁厚，壁孔和沟小或不明显。种皮内层的石细胞呈长方形或类圆形，壁厚、壁孔和凹坑明显。果皮表皮细胞表面呈多边形，垂壁无串珠。单一淀粉颗粒呈不规则圆形，复合颗粒由2-4个亚颗粒组成。两者的主要区别点是:五味子果皮表皮细胞为多边形，垂壁略呈串珠状，而五味子果皮表皮细胞表面为多边形，垂壁不呈串珠状。2.3色谱鉴别2.3.1薄层色谱法(TLC)薄层色谱法是中药鉴别中技术性较强的方法，应用广泛。韩郑州等用高效硅胶GF254nm板，以石油醚(60-90℃)展开石油醚(60-90℃)乙酸乙酯-甲酸(15:5:1)上层溶液2.3.2高效液相色谱(HPLC)冷文金等以五味子为对照品，大蒜素C18(4.6mm×250mm)柱，甲醇-水(65433结果五味子对照品*。www.xiangshui88.com产华中五味子共有***6个峰，只有1个峰与对照药材一致，可以鉴别。陈红选等人建立了五味子的指纹图谱。色谱柱为ODS柱(4.6mm×250mm)，检测波长为254nm，柱温为30℃，流速为1 HPLC min-1，流动相为甲醇-水梯度洗脱，分别使用五味子甲素、五味子乙素和五味子甲素。2.4光谱鉴别2.4.1紫外分光光度法邓等人取五味子水提取液，在200 ~ 400 nm波长范围内扫描。结果表明，五味子在282nm处有最大吸收，在274nm处有最小吸收。五味子在283nm处有最大吸收，在248nm处有最小吸收，以此作为鉴别依据。程秀敏等人分别用极性溶剂和非极性溶剂提取五味子，测定其紫外零级和二级导数光谱。结果极性溶剂提取物的光谱具有鉴别意义。五味子在272±6nm处有一个大的宽峰，而五味子在272nm处只有两个小肩峰。通过对二阶导数光谱的分析，发现两者在光谱形状和光谱数据上存在明显的差异。2.4.2荧光光谱程秀敏等分别测定了五味子和五味子的极性溶剂和非极性溶剂提取物的荧光光谱，结果表明五味子的激发光谱有三个峰和三个小肩，最大激发波长为257nm，最大发射波长为352nm。五味子的激发光谱有一个峰和三个肩峰，最大激发波长为210nm，最大发射波长为347nm。两者的激发光谱差异较大，具有鉴别意义。发射光谱差异小，无鉴别意义。在非极性溶剂提取物的光谱中，五味子的激发光谱有一个峰和一个小肩峰，最大激发波长为341nm。五味子的激发光谱有两个峰，最大发射波长为319nm，两者有明显区别。2.4.3红外光谱田金果等药材分别用石油醚、乙醚、水提取，提取液用溴化钾压片，扫描测定红外光谱。结果五味子与对照药材的光谱在数量、位置和www.flm8.com峰形态上一致，但部分峰的相对强度不同。华中五味子的光谱轮廓与华中五味子非常相似，说明其成分相似，但除了某些峰的相对强度外，还有几个新的吸收峰。这些光谱特征可以作为鉴别五味子和北五味子的依据。2.5生物鉴定2.5.1间简单序列重复(ISSR)技术ISSR技术是基于真核生物基因组中广泛存在1 ~ 6个碱基的短核苷酸序列的现象，以PCR为基础，利用20碱基重复锚定引物扩增基因组中这些重复序列之间的片段，具有稳定性好、多态性高的优点，已广泛应用于中药品种的鉴定。孙岳等用CTAB法从无果肉和果皮的五味子果实中提取总DNA，用ISSR技术扩增五味子和北五味子的基因组DNA。结果9个ISSR引物中有3个扩增出多态性条带，根据琼脂糖凝胶电泳显示的DNA条带差异可以快速区分五味子和北五味子。2.5.2随机扩增多态DNA (RAPD)技术是一种检测基因组DNA多态性和基因组遗传标记的方法。王迅等人用改良的高盐低pH法提取DNA，用随机扩增引物DNA法筛选适合鉴别五味子和北五味子的随机引物。结果，引物S429可以准确地区分五味子和北五味子，随机引物S429可以通过RAPD准确地区分五味子和北五味子。