中药化学专业执业药师辅导:色谱技术的应用

在分离水溶性或极性成分如生物碱、苷类、糖类、有机酸等化合物时，常用强极性溶剂如水、缓冲溶液等作为固定相，弱极性有机溶剂如氯仿、乙酸乙酯、丁醇等作为流动相，称为正相色谱:

分离脂溶性化合物时，如高级脂肪酸、油脂、游离类固醇等。，石蜡油可用作固定相，强极性溶剂如水或甲醇可用作流动相，这称为反相分配色谱。

2.吸附色谱的应用

(1)硅胶和氧化铝吸附柱层析过程中，吸附剂的用量一般为样品的30-60倍。如果样品极性较小，难以分离，吸附剂的用量可适当增加到样品量的100-200倍。

(2)对于硅胶和氧化铝吸附柱层析，应尽可能使用低极性的溶剂来装柱和溶解样品，以利于在吸附柱上形成较窄的原始条带。

(3)用于洗脱的溶剂的极性应逐渐增加。

(4)为了避免化学吸附，酸性物质应使用硅胶，碱性物质应使用氧化铝。

3.聚酰胺吸附色谱法

聚酰胺吸附属于氢键吸附，特别适用于酚类、醌类和黄酮类的分离。

(1)聚酰胺的性能及吸附原理

酰胺的羰基与酚类和黄酮类的酚羟基形成氢键缔合，或者酰胺键上的游离氨基与醌类和脂肪族羧酸上的羰基形成氢键缔合产生吸附。医教网的原始吸附强度取决于各种化合物与其形成氢键的能力。

①形成氢键的基团越多，吸附能力越强。

②键合位置对吸附力也有影响。那些容易形成内部氢键的，对聚酰胺的吸附会相对较弱。

③分子中芳构化程度越高，吸附作用越强；反之，则被削弱。

一般来说，各种溶剂在聚酰胺柱上的洗脱能力由弱到强，大致可以按以下顺序排列；水→甲醇→丙酮→氢氧化钠水溶液→甲酰胺→二甲基甲酰胺→尿素水溶液。

(2)聚酰胺色谱的应用

聚酰胺对一般酚类和黄酮类化合物的吸附是可逆的(单宁除外)，特别适用于此类化合物的制备和分离。原医学教育网可以用来去除植物粗提物中的单宁。此外，它还广泛用于极性和非极性化合物，如生物碱、萜类化合物、类固醇、糖和氨基酸。

4.大孔吸附树脂

(1)大孔吸附树脂的吸附原理:大孔吸附树脂是结合了吸附和分子筛性质的分子材料。吸附是范德华引力或氢键作用的结果，分子筛的性质是由其自身的多孔结构决定的。

(2)影响吸附的因素:大孔吸附树脂、溶剂、化合物的性质是影响吸附的三个重要因素。

(3)大孔吸附树脂的应用:苷类和糖类的分离，生物碱的精制，多糖、黄酮类和三萜类的分离。

(4)洗脱剂的选择:洗脱剂可以是甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。