中草药和处方制剂的显微鉴定简介

显微鉴别是指用显微镜鉴别药材的切片、粉末、游离组织或表面切片以及处方制剂中药材的组织、细胞或内含物的特征的方法。

鉴别时,选取有代表性的样品,按该药材各鉴别项目的规定制片。处方制剂按照不同的剂型加工,然后制成片剂。

1.横向切片或纵向切片:选取药材适当部位,软化后用手工或滑动切片法切成10 ~ 20μ m的薄片,用甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其他试液处理后观察。如果需要,可以嵌入切片。【医学教育网收集整理】

2.粉末制作:取少量粉末,置于载玻片上,平铺,用甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其他适宜的试液处理,观察。

3.表面制作:样品润湿软化后,切去一部分或撕掉其表皮,加入适当的试液进行观察。

4.游离组织切片:如果样品中薄壁组织占多数,木质化组织较少或分散,可采用氢氧化钾法;如果产品较硬,木质化组织较多或成大团成束,可采用硝基铬酸法或氯酸钾法。在解离之前,样品应切成约2mm宽或2mm厚的小条或小块。

1.氢氧化钾法

将样品置于试管中,加入适量5%氢氧化钾溶液,加热至能用玻璃棒挤压分散,倒掉碱液,用水冲洗,取出少量置于载玻片上,用解剖针撕开,用稀甘油装置观察。

2.硝基铬酸法

将样品置于试管中,加入适量的硝酸铬酸试液,静置至能用玻璃棒挤压分散,倒掉酸液,加水洗涤,按1的方法操作装置。

3.氯酸钾法

将样品置于试管中,加入硝酸溶液(1→2)和少量氯酸钾,缓慢加热。当气泡逐渐减少时,及时加入少量氯酸钾,维持气泡稳定出现,直至能用玻璃棒挤压分散。倒掉酸液,加水冲洗,按照1的方法操作装置。

5.花粉粒和孢子的制作:取花粉、花药(或小花)或孢子囊(干燥样品用冰醋酸浸泡软化),用玻璃棒捣碎,离心管过滤,离心,取沉淀,加入1 ~ 3 ml新配制的乙酸酐和硫酸混合溶液(9: 1),水浴加热2 ~ 3分钟。也可通过水合氯醛试验装置观察。【医学教育网收集整理】

6.细胞和细胞内含物的测量:在显微镜下测量细胞和细胞内含物的大小,可用目镜测微计测量。首先将目镜测微计放入目镜中,用显微镜架进行标准化。标准化时,旋转目镜,移动载物台上的显微镜刻度,使两个刻度的刻度平行,左边的“0”刻度重合,然后找到第二个重合的刻度。根据两个重叠标尺之间两个标尺的单元数,计算出物镜条件下目镜测微计每个单元的等效尺寸(微米)。测量时,用目镜测微计测量物体的细胞数,乘以每个细胞的大小(微米)。通常在高倍物镜下进行,但在低倍物镜下测量较长纤维、非腺毛等长度更方便。记录数值和最小值(微米),允许有少量数值略高于或低于药典规定的数值。

七。细胞壁特性的验证:

1.木质化细胞壁

加入1 ~ 2滴间苯三酚试液,放置一段时间,加入1滴盐酸,因木质化程度不同呈红色或紫红色。

2.木栓化或角质化的细胞壁

加入苏丹红ⅲ试液,放置一旁或略加热,由橙色变为红色。

3.纤维素细胞壁

加入氯化锌碘试液;或者先加入碘试液,放置一段时间后,再加入硫酸溶液(33→50);显示蓝色或紫色。

4.硅化细胞壁

加入硫酸没有变化。

八、细胞内含物性质的验证:

1.淀粉颗粒

(1)碘化试液,蓝色或紫色。

(2)使用甘油-醋酸试验装置,在偏光显微镜下观察,未糊化的淀粉颗粒呈现偏光现象;胶化的非偏振光现象。