如何做药敏试验
药敏试验用于确定药物敏感性,以便准确有效地使用药物进行治疗。但由于药敏试验要求严格,条件高,只能在大专院校或科研单位操作,部分养殖厂或部分门诊很难操作药敏试验。为了解决这一问题,农业部动物检疫所青岛亿邦生物工程有限公司动物疫病诊疗中心经过几年的总结和实践,逐步总结出了几套适合基层进行药敏试验的操作方法。目前临床微生物实验室的药敏试验方法主要有纸片扩散法、稀释法(包括琼脂和肉汤稀释法)、抗生素浓度梯度法(E-test法)、自动化仪器等。
纸张扩散法
这种方法是在接种了试验菌的琼脂表面粘贴一张含有定量抗菌药物的滤纸,纸中的药物在琼脂中扩散。随着扩散距离的增加,抗菌药物的浓度呈对数下降,从而在纸张周围形成浓度梯度。同时,纸张周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长,抑菌范围外的菌株可以生长,从而在纸张周围形成一个透明的抑菌圈。不同抑菌药物的抑菌圈直径可能因药物在琼脂中的扩散速度而不同。抑菌圈的大小可以反映试验菌对药物的敏感性,与药物对试验菌的MIC呈负相关。
稀释法
稀释药敏试验可用于定量检测抗菌药物对某种细菌的体外活性,分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。在实验中,抗菌药物的浓度通常按倍比(lg2)稀释,能抑制待测菌生长的最低药物浓度为最低抑菌浓度(MIC)。特定抗菌药物的检测浓度范围应包括能检测出细菌的解释性拐点(敏感性、中间性和耐药性)的浓度,还应包括质控用参考菌株的MIC。