用缓冲液稀释样品和用水稀释样品的区别。

4倍加载缓冲器的使用:

1，按照每30微升蛋白质样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)。如果蛋白质浓度过高，可以用双蒸水稀释。

2.混合后，在100℃的水浴中加热5-10分钟，使蛋白质变性。

3.冷却至室温后，以10000-14000rpm离心2-5分钟，直接取上清液进行电泳。

5倍加载缓冲器的使用:

1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液(5X)。水浴溶解后立即室温保存，尽量避免长时间置于水浴中。

2.按照每4微升蛋白质样品加入1微升蛋白质上样缓冲液(5X)的比例，混合蛋白质样品和蛋白质上样缓冲液(5X)。

3.100℃或沸水浴3-5分钟，使蛋白质充分变性。

4.冷却至室温后，直接将样品上样至SDS-PAGE凝胶上样孔。

5.当蓝色染料到达胶水底部时，电泳通常会停止。