女贞子的药理研究
取本品粗粉约65438±0g,精密称定,加乙醇50ml,加热回流30分钟,放冷,滤过,残渣如上加乙醇,再回流两次,合并滤液,蒸干,加无水乙醇微热使残渣溶解,转移至65438±00ml容量瓶中,加乙醇至刻度,摇匀,即得供试品溶液。另外,准确称取齐墩果酸对照品,加入无水乙醇,制成每1ml含0.5mg的溶液作为对照品溶液。照薄层色谱法试验(附录ⅵ b),分别精密吸取供试品溶液2μl、对照品溶液4μl、8μl,于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-丙酮-乙酸乙酯(5:2:1)为展开剂,展开,取出,干燥,喷以10%硫酸乙醇溶液。[S]& gt;=530nm,λ& lt;[R]& gt;=700nm,测量测试样品的吸光度积分值和参考样品的吸光度积分值,并计算。本品中齐墩果酸(C30H48O3)的含量不得少于0.60%。1.降血脂和抗动脉硬化。
将女贞子粗粉(20g/ kg)喂入日粮中,可降低实验性高脂血症家兔血清胆固醇和甘油三酯含量,减少主动脉脂质斑块和冠状动脉粥样硬化斑块的形成。每公斤女贞子含齐墩果酸30毫克。混入饮料中喂给大鼠,灌胃给家兔0.4%齐墩果酸混悬液0.5ml,对高脂血症大鼠和家兔均有降血脂作用。添加30 mg/kg和60mg/kg齐墩果酸饲喂日本鹌鹑8周,显著降低血清总胆固醇、过氧化脂质和动脉壁总胆固醇含量,降低动脉粥样硬化发生率。
1.降低血糖
皮下注射齐墩果酸(50,100mg/kg)7天,可降低正常小鼠的血糖,防治四氧嘧啶引起的糖尿病,还可对抗肾上腺素或葡萄糖引起的血糖升高。
3.抗肝损伤
皮下注射30,50,100 mg/kg齐墩果酸可抑制四氯化碳诱导的大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(SGPT)升高,皮下注射50,100 mg/kg齐墩果酸也可降低未经四氯化碳处理的大鼠的SGPT。70mg/kg皮下注射齐墩果酸可减轻四氯化碳引起的肝损伤。组织学上,肝细胞空泡变性、疏松变性、坏死、间质炎症较相应对照组轻。齐墩果酸(2mg/只)皮下注射6 ~ 9周,对高脂食物和四氯化碳引起的大鼠肝硬化有防治作用。电镜观察表明,皮下注射齐墩果酸(20mg/只)可减轻肝细胞线粒体肿胀和内质网囊泡变性。
4.对机体免疫功能的影响。
⑴对非特异性免疫的影响
①增加外周白细胞数女贞子能显著增加外周白细胞数,其有效成分为齐墩果酸。醇提物能恢复环磷酰胺(cy)诱导的小鼠白细胞减少症。蒸女贞子480mg/kg对正常小鼠白细胞无影响,但能纠正泼尼松龙(25mg/kg,ip)引起的白细胞下降。
②对网状内皮系统吞噬功能的影响以血液异物清除率观察巨噬细胞的活性。发现灌胃240mg/kgx5d的女贞子能显著提高小鼠iv碳粒廓清指数,增强网状内皮系统活性。女贞子480mg/kg,效果不明显。女贞子汤(12.5g/kgx7d)对清除指数无明显影响,而25g/kgx7d明显抑制网状内皮系统的吞噬作用。
⑵对特异性免疫的影响
①对细胞免疫功能的影响女贞子能明显提高T淋巴细胞的功能。女贞子的水提取物。0.02ml显著增强PHA、COA和PWM体外诱导的淋巴细胞增殖,也显著增强异种(人)淋巴细胞诱导的大鼠局部移植物抗宿主反应(GUH),这可能部分是通过消除或削弱抑制性T细胞实现的。女贞子多糖(LLPS)能增强ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖:3H-TdR掺入值(CPM)为10 mg/kg,比对照组(17959 4508)的P<高约65438。0.01.50毫克/公斤(2979±3625)组比对照组提高了70%左右,P < 0.07 .女贞子汤能促进SRBC诱导的迟发型超敏反应。说明女贞子能增强细胞免疫功能。齐墩果酸40mg,每日三次,1-2个月,可提高肿瘤患者的免疫功能,用皮肤泡法观察巨噬细胞的吞噬功能和血液淋巴细胞的玫瑰花结形成明显改善。
女贞子的水提物和醇提物都能诱导MIL-1,水提物比醇提物强。这一结果揭示了女贞子的免疫促进作用可能与诱导M?-IL-1。同时,女贞子可以通过增强细胞表面受体的活性来促进T细胞的活性。女贞子可能是一种很好的免疫调节药物,用于治疗Ts活性过高引起的免疫功能低下。
②对体液免疫功能的影响女贞子能增强体液免疫功能。女贞子煎剂ig 12.5 ~ 25g/kg连续7天能增加大鼠胸腺和脾脏的重量。大剂量可增加成年大鼠脾脏重量。女贞子240mg/kg和480 mg/kg蒸7天能明显增加C57BL小鼠脾脏、胸腺、腹腔淋巴结和肾上腺的重量。女贞子多糖每天注射1次,100mg/kg连续7天使LACA小鼠脾重比对照组增加40%左右,50mg/kg使小鼠脾重比对照组增加30%左右。女贞子汤能明显提高小鼠血清溶血素抗体的活性,还能提高正常小鼠血清IgG的含量,对抗Cy的免疫抑制作用;清蒸女贞子能明显对抗泼尼松龙的免疫抑制作用,提高小鼠血清IgG,增加泼尼松龙免疫抑制小鼠的IgG含量,明显提示小鼠对白蛋白抗体活性的记忆。女贞子多糖对Cy50mg/kgip诱导的荷瘤小鼠(S180)淋巴细胞增殖抑制作用较低,女贞子多糖对Cy有明显的抑制作用。
⑶对过敏反应的抑制作用:女贞子煎剂12.5,25g/kgig小鼠7d;相同剂量的5dig大鼠和不同剂量的女贞子对小鼠或大鼠的被动皮肤过敏反应(PCA)有明显的抑制作用。女贞子汤能降低大鼠颅骨肥大细胞脱颗粒百分率,对抗组胺引起的皮肤毛细血管通透性增加。在攻击前施用抗原可以抑制小鼠中由DNCB引起的接触性皮炎。抗原攻击后给予女贞子25g/kg也能显著抑制DNCB引起的小鼠皮肤接触过程。减少大鼠主动和逆转被动关节炎反应;20g/kg女贞子能显著降低豚鼠血清总补体。说明女贞子对ⅰ、ⅱ、ⅳ型过敏反应有明显的抑制作用。
⒌抗炎作用
采用多种实验性炎症模型证明女贞子具有抗炎作用。12.5g/kg,每日25g/kg ig,连用5天,对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶、蛋清、甲醛致大鼠足垫肿胀有明显抑制作用。20g/kg×3天ig女贞子能显著减少大鼠炎症组织中PGE的释放;20g /kg×7天女贞子可抑制大鼠棉球肉芽组织增生,并伴有肾上腺重量增加。
其抗炎机制可能涉及以下几个方面:
①激活垂体-肾上腺皮质系统,促进皮质激素的释放;
②抑制PGE的合成或释放。此外,女贞子能降低豚鼠血清补体活性,对抗组胺引起的皮肤毛细血管通透性增加,因此女贞子的抗炎机制可能也包括上述作用。
6.抗癌抗突变
齐墩果酸对小鼠肉瘤-180有抗肿瘤作用。口服女贞子汤(12.5,25g/kg),皮下注射齐墩果酸(50,100mg/kg),明显抑制环磷酰胺和乌拉坦引起的小鼠骨髓微核率升高。
⒎对内分泌系统的影响
研究表明,女贞子中既有雌激素样物质,也有雄激素样物质。经放射免疫测定,女贞子含睾酮428.438±0pg/g,雌二醇65438±039.02 pg/g..证明女贞子同时具有类睾酮和类雌二醇激素类似物,即同一种药物具有双向调节作用。女贞子等中药对无力小鼠的阴道粘膜产生了雌激素样作用。用药组兔卵巢内大卵泡数量明显增多,雌激素增加。
⒏对造血系统的影响
女贞子能促进红细胞生成。女贞子能促进CFU-E的生长。CFU-E/5×l4的比值为128.6 11.4ϋ,CFU-E/股骨的比值为62040±5450 ϋ.股骨CFU-E显著高于生理盐水组,而CFU-D显著降低。给药后小鼠骨髓细胞形态学分析显示,女贞子组红系细胞百分比比NS组高47.3±2.99[6],粒系细胞百分比比NS组低37.6±3.96[6],粒系细胞与红系细胞的比例也相应发生变化。
9.环磷酰胺对染色体损伤的保护作用
环磷酰胺和乌拉坦对染色体损伤的保护作用
微核试验表明女贞子水煎液对小鼠有毒性。POL 2.5g/kg 25.0g/(kg·d)×6,齐墩果酸ih50mg/kg,100mg/(kg·d)×7对环磷酰胺IP 50m g/(kg·d)×2和乌拉坦500mg/(kg·d)均有效。
⑳抗HpD光氯化
女贞子具有抗HpD光氧化作用,其体内应用可明显降低HpD对小鼠的皮肤光敏反应。女贞子60mg生药/ml能明显降低HpD5ug/ml联合10min照射引起的红细胞丙二醛含量升高,抑制率为57.7%,明显对抗红细胞膜乙酰胆碱酯酶活性的抑制,抑制率为49。O%。当其为120mg/ml时,抑制率为53.3%,小鼠IPHPD20。女贞子产生1O2的效率比对照组低3.5×10-4倍。
⑴其他功能
女贞子还具有强心、扩张冠状血管、扩张外周血管等心血管系统作用。利尿、镇咳、通便和抗菌作用。齐墩果酸有一定的强心利尿作用;甘露醇有减缓作用;它还含有大量的葡萄糖;这些可能与其作用强有关。