微生物检验中的注意事项

微生物学(Microbiology)是包括细菌、病毒、真菌和一些小型原生动物在内的一大类生物，它非常微小，与人类生活密切相关。广泛涉及健康、医药、工农业、环保等诸多领域。在中国大陆的教科书中，微生物被分为以下八类:细菌、病毒、真菌、放线菌、立克次体、支原体、衣原体和螺旋体。以下是我给大家带来的关于微生物检测注意事项的知识。欢迎阅读。

第一，培养基的灭菌和使用

(1)每次配置时，注意其生产日期是否在保质期内，检查其开瓶日期和瓶封情况，确保没有变质，没有吸潮。

(2)培养基配置时，称量要准确，包括盐水的分装。

(3)确保配制好的培养基现在就灭菌，未灭菌的配制好的培养基不能长时间放置，更不能过夜。

(4)灭菌时保证恒温恒压，同时保证有效灭菌时间。

(5)灭菌后的培养基应在冰箱中保存一周，一般不超过三天。然后跟着它走？先进先出？原则上先用先备。

(6)使用时，根据每班的使用量，先用水浴锅将培养基融化成液态，然后及时降低水温(融化后的培养基可从水中取出，放在水浴锅的盖子上)备用，切勿使培养基长时间处于高温状态。

(7)检验产品的微生物时，倾注培养基的温度应在45℃左右，不能过热，以免烫伤细菌致死；不能太冷，融化的培养基结块凝固，不方便观察结果。

(8)每瓶培养基应是空白的。

(9)尽可能集中采样，避免频繁打开同一瓶培养基的瓶塞，增加培养基污染概率，导致结果错误。

(10)如果介质太少，可以先倒成空白板。

第二，样本环境的维护

(1)环境(房间)

1)采样时，应关闭窗户和空调，或在室内喷洒酒精，防止室内空气流通影响超净台内部环境(最好在有通风系统的恒温恒湿无菌室操作)。

2)如果在原辅料微生物检验室取样，应定期开启紫外灯对室内进行消毒。

(2)小环境(超净平台)

1)定期清洗初滤器，及时更换。

2)采样前，清洁超净台内部，用75%酒精擦拭并提前半小时开启超净台紫外线灯，对超净台内部环境进行消毒。

3)关掉紫外线灯，打开风扇，调节合适的进风量，不能太低。

4)每次样品制备后，清洁超净台内部，并用75%酒精擦拭。

5)紫外线灯应根据其使用寿命及时更换。

6)样品制备的同时，应做相应菌落检测的环境空白。

7)采样区域的选择:

A.一般在超净台外缘1/3-2/3区域进行无菌操作；

b、在酒精灯火焰的外焰保护区进行操作。

第三，仪器的清洁度

(1)玻璃器皿:采用干热灭菌法灭菌。

(2)用于制样的剪刀、勺子等物品应为制样专用，不得与其他操作器械混用。使用时，先用75%酒精消毒，再用火烧消毒。

(3)接种针(环)采用灼烧灭菌，但需要注意的是，制作样品时应先将接种针(环)冷却。

四、样品采集和检测

(1)确保取样仪器无菌。

1)玻璃器皿:应采用干热灭菌，保证温度恒定，时间充足(但时间不宜过长，导致玻璃器皿容易破裂报废)。

2)采样篮:使用前应喷洒75%酒精消毒。

3)取样勺和浓缩奶样:确保清洁消毒，清洁后用75%酒精擦拭消毒。

4)采样袋:可用酒精擦拭消毒，然后在超净台上用紫外灯照射消毒(包装车间应在转运窗口用紫外灯消毒)。

5)电子秤表面用75%酒精消毒。

(2)人员操作

1)保证手的清洁消毒:采样前洗手，然后消毒，再做样品。

2)抽样应具有代表性(随机样本、目标样本和综合样本)，并有明确标记。

3)取样后，不要在车间停留。及时将样品放入超净台，用紫外线对其外表面进行消毒。

4)在要求的采样区域操作。

5)采样前，先用75%酒精棉球擦拭消毒样品袋口，再打开。

6)向盐水瓶中加入样品时，注意勺子或袋子尽量不要碰到瓶口。

7)样品计量要准确，稀释倍数也要准确(1mL移液管不允许碰掉管口)。稀释100倍时，应将1mL移液管伸入盐水中，样本管管壁不得向下流动，避免刺破管底。

8)盐水的温度要在40℃左右，不能太热烧伤部分微生物，也不能太低使奶粉完全溶解。

9)稀释时，摇匀以保证溶液的均匀性。

10)倒皿时，注意培养基的瓶口不要碰到皿；倒的培养基要合适，不能太少，微生物在培养过程中会死亡，合适的量在15mL左右。

11)制作大肠菌群样品时，乳糖胆盐培养基的培养管应事先按所需量准备好，放入超净台中，进行外表面紫外线灭菌。

12)进行第二步时，需要先将接种针(环)冷却，避免出现取不到菌落导致无法判断确认的情况。

13)样品制备完成后，及时放入相应的培养箱中培养，清洗超净台。

动词 （verb的缩写）微生物的培养

(1)在培养过程中，要随时监控培养箱的温度，确保在合适的温度下培养。

(2)按照微生物检验规范的要求及时观察结果，发现异常及时分析原因反馈。

；