中药化学成分全预试(六):黄酮类及其苷类
(1)盐酸-镁粉反应:+HCl-Mg →红色。
(2)三氯化铝反应:+AlCl3 →黄色
(3)浓氨反应:+NH3→亮黄色或橙色。
(4)薄层色谱检查:吸附剂-聚酰胺或硅胶g
(1)单镁(或锌)盐酸盐粉末试验:取1ml样品的乙醇溶液,加入少量镁粉(或锌粉),然后加入4-5滴浓盐酸,在沸水浴中加热2-3分钟。如果变红,说明是游离的黄酮或黄酮苷(采取同样的方法,不加镁或粉末作为对照,如果两管都变红,就。如果继续加入碳酸试液使其呈碱性,就会变成紫蓝色,证明其中含有花青素。
在盐酸存在下,黄酮类化合物的乙醇溶液可被镁粉还原生成花青素,【医学教育,网上搜索收藏】显示红色或紫色反应(个别为淡黄色、橙色、紫色或蓝色)。这是因为酮类化合物的分子中含有一个碱性氧原子,可溶于稀酸中还原成四价氧原子,即锌盐。这种方法是一种鉴别黄酮类化合物的反应。但花色素本身在酸性下是红色的(不加镁粉),要加以区分。
注(1)此反应仅在化学结构上,三位羟基的酮醇颜色明显,其他黄酮醇不明显。所以不能在检测为阴性的情况下做出否定的结论,需要结合其他实验才能做出结论。②试验应在酒精中进行,水分多会影响颜色形成。这个反应比较慢,有时需要水浴加热来促进反应。
(2)荧光测试:
①三氯化铝试验:将样品的乙醇溶液点于滤纸上(干燥后点1次,使其浓度适中),干燥后喷1%三氯化铝乙醇试液,紫外灯下观察,呈黄色、绿色、橙色等荧光为黄酮类;显示天蓝色或黄绿色;荧光,是二氢黄酮。这是一个鉴别二氢黄酮的鉴别反应。
②硼酸丙酮柠檬酸丙酮试验:取1ml样品的乙醇溶液,蒸发加入0.5ml饱和硼酸丙酮溶液和0.5ml 10%柠檬酸丙酮溶液,在紫外灯下观察。试管显示强烈的绿色荧光(黄酮或其糖苷)。
(3)碱性溶液试验:取供试品的乙醇溶液,点于滤纸上(干燥后,再次点以浓缩其溶液)。干燥后,喷入1%碳酸钠溶液或在氨蒸气中熏几分钟,呈亮黄色、绿色或橙黄色。比如氨气熏过的滤纸暴露在空气中,颜色会逐渐褪色,变成原来的颜色(黄酮类或苷类)。