急~ ~各位大神，帮帮忙，关于医用药物的结构分析...在线等。
系统预试验法——利用一些简单的定性试验，对中药所含的各种化学成分进行全面检查。
单项预检验法——根据需要，重点对某一类成分或某一有效成分进行检验。
方法:试管反应+薄层色谱检查。
中草药主要来自植物。植物的化学成分比较复杂，有些成分是在植物中发现的，如纤维素、蛋白质、油脂、淀粉、糖、色素等。有些成分是某些植物所特有的，如生物碱、苷类、挥发油、有机酸、鞣质等。
各种化学成分都有一定的特征，药材的外观、色、香、味一般可作为初步检验判断的手段之一。如果药材样品破碎，挤压后横截面无油斑或油痕，则含有较多的油或挥发油；有粉层的含有淀粉和糖；有特殊气味者，多含挥发油、香豆素、内酯；有甜奈者含糖量多；大多含有生物碱、苷类和苦味；味道酸的含有有机酸；有涩味的大多含有单宁之类的。
中草药中所含的化学成分都是多种多样的混合物，在分析时往往相互干扰，不容易得到正确的结果。所以要根据中草药中所含各种化学成分的溶解度、酸碱度、极性等理化性质，通过各种成分的鉴别反应来鉴别。
一、试验前溶液的制备
1，水提取物-糖、多糖、有机酸、皂甙、酚、鞣质、氨基酸、多肽、蛋白质...
2、乙醇提取物——酚类、鞣质、有机酸、香豆素、强心苷、黄酮类、蒽醌、类固醇...
3，5%盐酸-乙醇提取物-生物碱
4、石油醚提取物——类固醇、萜类、脂肪油...
(1)鉴定注意事项
1.根据灰分成分的不同性质，选择合适的溶剂进行提取，确保成分能够被提取出来。
2.样品提取物的浓度应足以达到每个反应的灵敏度。
3.样品提取液的pH值不应影响鉴定反应所需的pH值。差异较大时，应提前调整。
4.提取物较深时，往往容易影响观察和鉴别反应的效果。此时可适当稀释或进一步提纯。
5.要注意防止鉴别反应中各种成分的干扰，以免出现假阳性或颜色不正确。化学鉴别的同时最好做空白试验和对照试验(用已知含有某种成分的中药材或纯品作为阳性对照)。
6.在鉴别试验中，如果某一成分的几种鉴别反应结果不一致(即有的是阳性有的是阴性)，应进行综合分析。首先要注意阳性试验是否属于该类成分的特定反应，否则要检查其他种类的成分是否能产生这种反应，从多方面进行判断。但也要注意，有些反应只能对某一类成分中的某一化学基团反应，如检查黄酮类化合物的盐酸镁粉试验，只对黄酮类化合物中的羟基黄酮类化合物(黄酮醇)反应明显，其他类黄酮类化合物不明显，但不能轻易否认不是黄酮类化合物。为了避免孤立和片面的结论，必须考虑全面的分析。
中药材化学成分的一般鉴定试验只是初步判断，最终的确认还需要进一步提纯，鉴定后才能肯定。
(2)识别方法
1，氨基酸，肽，蛋白质。
(1)加热沉淀试验:加热至沸腾→混浊或沉淀(蛋白质)
+5%H2SO4(未加热)→混浊或沉淀
(2)缩二脲试验:+40%NaOH，1%CuSO4 →紫色、红色或紫红色(多肽、蛋白质)。
(3)茚三酮反应:+0.2%茚三酮试液→蓝色或紫蓝色(氨基酸、多肽、蛋白质)。
(4)靛醌反应:+靛醌试液→各种颜色(氨基酸)
(5)米隆反应:+Hg，H2NO2 →红色(蛋白质分子中含有酪氨酸)。
(6)霍普金斯-科尔反应:+乙醛酸、浓硫酸→各种颜色(蛋白质分子由色氨酸组成)。
(7)氨基酸的薄层色谱检查:吸附剂-硅胶g
显影剂-正邦，正邦:HAC: H2O
显色剂-0.25%茚三酮试液→紫色斑点
(1)加热或无机酸试验:在试管中取1毫升样品水溶液，加热至沸腾或加入5%盐酸。如果出现浑浊或沉淀，说明含有水溶性蛋白质。
(2)缩二脲试验:取1ml供试品水溶液，加入2滴10%氧化钠溶液，摇匀，逐渐加入硫酸铜试液，每次加入时摇匀，并注意观察。如果呈紫色或紫红色，可能含有蛋白质和氨基酸。
所有的蛋白质结构都含有两个或两个以上的肽键(- CONH -)，在碱性溶液中能与Cu2+反应生成仙女络合物，表现出一系列的显色反应。二肽是蓝色，三肽是紫色，带肽的是红色。肽键越多，颜色越红。
(3)茚三酮试验:取65438±0ml样品水溶液，加入2-3滴茚三酮试液，加热煮沸4-5分钟，待其冷却至红色、棕色或蓝紫色(蛋白质、蛋白胨、肽和氨基酸)。
氨基酸与茚三酮反应，其酸被氧化成醛、氨和二氧化碳，茚三酮被还原成仲醇，仲醇与氨和另一分子茚三酮缩合生成蓝紫色化合物。
注①茚三酮试剂主要是多肽和氨基酸的显色剂，在1小时内反应稳定。试剂溶液的pH值应为5-7，必要时可加入几滴吡啶或乙酸钠进行调节。②这种反应非常敏感，但有些氨基酸是黄色而不是紫色，比如脯氨酸。
(4)氨基酸薄层色谱检测反应:
①吸附剂:硅胶g
②展开剂:(1)正丁醇:水(1: 1) (2)正丁醇:乙酸:水(4: 1: 5)。
③着色剂:0.5%茚三酮丙酮溶液，喷洒后放入1100的烘箱中5分钟，呈蓝紫色或紫色。
2.皂甙
(1)泡沫端测试:摇动→大量持续性泡沫端。
泡末高度相同的+0.1M HCl(三萜皂苷)
+0.1M NaOH碱管高于酸管(甾体皂甙)。
(2)溶血试验:+2%红细胞悬液→溶血。
(3) Lieberman-Burchard反应:+乙酸酐-浓硫酸-紫红色(三萜皂苷)
黄色-红色-紫色-污绿色(甾体皂甙)
(1)泡沫试验:取2ml样品水溶液于带塞试管中，用力摇动3min，以生成永久蜂窝状泡沫(维持10分钟以上)，泡沫量不少于液体体积的1/3。
注意常用的增溶剂吐温和司盘在摇动时会产生持续的泡沫，注意区别。
(2)溶血试验:取4支试管，分别加入0.25 ml、0.5 ml、0.75 ml滤液，然后依次加入2.25 ml、2.0 ml、1.75 ml、1.5 ml生理盐水，使每支试管中的溶液变为2.5ml，再向每支试管中加入2.5ml的2%血细胞悬液。如果有溶血，则显示阳性反应。
注意事项①鞣质能凝集红细胞，干扰溶血试验观察，应提前除去(可用丙烯酰胺粉吸附或明胶沉淀)。②试液应呈中性。
(3)乙酸酐浓硫酸试验(Liebrmann Burchard反应)取样品水溶液置于蒸发皿中，水浴上蒸发，残渣加入少许冰醋酸使其溶解，再加入乙酸酐浓硫酸(19: 1)试液，试液呈红紫色，变为污绿色(甾体、三萜或皂苷)。
(4)区分甾体皂苷和三萜皂苷:取两个带塞子的试管，每个样品1 ml溶于水中，将2ml 0.1N盐酸溶液加入到另一个试管的1ml 0.1N氢氧化钠溶液中，用力摇动1min(左右手应交替摇动半分钟)，观察两个试管的泡沫。如果碱管中的泡沫比酸管中的泡沫多，则甾体含量表示甾体皂苷。
三萜皂苷是在酸性水溶液中形成稳定泡沫的酸性皂苷。甾体皂甙是中性皂甙，在碱性溶液中能形成稳定的泡沫。
浓硫酸、高氯酸、高氯酸-香草醛、浓硫酸-香草醛等的显色原理。主要是将羧基脱水，增加双键结构，然后通过双键置换、双分子缩合等反应生成* * *轭双键体系，再在酸的作用下形成阳离子碳离子盐显色。
3.糖和糖苷
(1)林飞试剂:+硫酸铜，酒石酸钾钠-砖红色沉淀(还原糖)
(-)+1% HCl+NaOH沉淀(苷元)
△30分钟上清液(+)(多糖、苷)
(2)莫利什反应:+α-萘酚-浓硫酸→品红色环。
(3)银镜反应:+0.1N硝酸银，5N氨→银棕色(还原糖)
(4)薄层色谱检查:吸附剂-硅胶G或纤维素。
显影剂:正丁醇:钯:buoh15%HAc
显色剂-苯胺-邻苯二甲酸
(1)碱性酒石酸铜试液:取1-2ml供试品水溶液(如果是醇溶液，必须蒸发掉醇)，加入1-2ml碱性酒石酸铜试液，沸水浴中加热5min，产生棕红色或砖红色氧化亚铜沉淀，指示还原糖。
还原糖可将铜盐(蓝色)还原为氧化亚铜，醛糖的醛基氧化为羧基；
注①如果试液呈酸性，应先碱化。(2)该反应产生的沉淀颜色因条件不同而不同。粒子上的是黄色，粒子上的是红色。当有滞留胶体时，常产生黄色沉淀。③样品中含有其他具有强还原性的醛、酮等成分，或中药制剂中添加的抗氧化剂；葡萄糖等可以是阳性。
(2)α萘酚试验(莫利施氏紫环反应):取1ml样品水溶液，加入几滴5%萘酚试液并摇匀，然后沿管壁滴加5-6滴浓硫酸，形成两液层，2-3分钟后，两液层上出现紫环(糖、多糖或糖苷)。
多糖用浓硫酸水解成单糖，单糖用浓硫酸脱水生成糠醛类化合物，在浓硫酸存在下与α萘酚反应生成紫红色缩合物。
注①糖苷的分子结构中含有糖基，一般属于单糖，如葡萄糖、鼠李糖、半乳糖，但也有二糖或多糖。在上述反应条件下，糖苷水解成单糖，所以糖苷萘酚试验是分子中糖部分的反应。(2)由于此反应敏感，若溶液中有少量滤纸纤维或中草药粉末存在，可产生上述反应。所以要注意过滤。
(3)多糖的确证试验:取5ml样品水溶液蒸干，加入1ml蒸馏水，5ml乙醇。如果出现沉淀，过滤收集，然后用少量热乙醇洗涤，再将沉淀溶于3ml蒸馏水中，做如下试验。
①碘试验:取65438±0ml样品非溶液，加入65438±0滴碘试液，观察颜色变化。如果是蓝黑色，就是地衣糖；紫黑色是糊精；加热时蓝色消失，冷却后重新呈现淀粉状。
②多糖水解:取1ml供试品水溶液，加入5滴稀盐酸，在沸水浴中加热10-15min，然后用10%氢氧化钠溶液中和至中性，加入4滴新配制的碱性酒石酸铜，再取1ml供试品溶液，不加酸直接水解。如果水解后产生的棕红色常数比不水解时多，则有多糖。
多糖水解产生单糖，利用单糖的还原性将铜离子还原成氧化亚铜。
4.酚类和单宁
(1)FeCl3试剂:+1%FeCl3试液→蓝色、深绿色或蓝紫色。
(2)氯化铁-铁氰化钾试剂:喷洒→蓝点。
(3)香草醛-盐酸试剂:喷雾→红色(间苯二酚、间苯三酚)
(4)重氮盐试剂:+对硝基苯胺，亚硝酸钠→红色。
(5)薄层色谱检查:吸附剂-硅胶G或纤维素。
显像剂-正邦:HAC:H2O；15%HAc
显色剂-1% FeCl _ 3试液
1%氯化铁-1%铁氰化钾试液→蓝色、绿色或黑色。
单宁和酚类的区别:+明胶-沉淀
上清液+1%FeCl3试液→蓝色、深绿色或蓝紫色。
(1)三氯化铁试验:取1ml样品水溶液，加入1-2滴三氯化铁试液，呈绿色、污绿色、蓝黑色或深紫色(水解单宁呈蓝-蓝-黑色，缩合鞣制呈绿色-污绿色)。
单宁是多元酚的衍生物，即多元酚，能与三价铁离子反应生成复盐。
请注意，如果存在无机酸、有机酸和醋酸盐，该反应会阻碍颜色的形成。硝基酚对氯化铁试剂无明显反应。
(2)明胶试验:取1毫升样品水溶液，加入2-3滴氯化钠溶液，产生白色沉淀。
丹宁酸具有凝结蛋白质的特性。
(3)溴试验:取1ml样品水溶液，加入1-2滴溴试液，产生白色或沉淀，说明可能含有苯酚或儿茶酚鞣质。
溴太多会阻碍单宁的沉淀，所以不宜多加溴水。
(4)香草醛-酸试验:将样品水溶液点于滤纸上，干燥后，喷或滴香草醛-盐酸试液，显示红色斑点(多酚)。
(5)薄层色谱法检测鞣质和酚类物质:
①吸附剂:聚酰胺；硅胶；硅胶；石膏:与水(5: 1: 7)混合，涂成薄片，在1050干燥45分钟。
②展开剂:乙醇:乙酸(100:2)；正丁醇:乙酸乙酯:水(5:4:1)；苯:甲醇(95: 5)。
③着色剂:10%氯化铁溶液；1%氯化铁乙醇溶液和1%铁氰化钾水溶液(1: 1)呈蓝紫色斑点。
5.黄酮类化合物及其糖苷
(1)盐酸-镁粉反应:+HCl-Mg →红色。
(2)三氯化铝反应:+AlCl3 →黄色
(3)浓氨反应:+NH3 →亮黄色或橙色。
(4)薄层色谱检查:吸附剂-聚酰胺或硅胶g
(1)单镁(或锌)盐酸盐粉末试验:取1ml样品的乙醇溶液，加入少量镁粉(或锌粉)，然后加入4-5滴浓盐酸，在沸水浴中加热2-3分钟。如果变红，说明是游离的黄酮或黄酮苷(采取同样的方法，不加镁或粉末作为对照，如果两管都变红，就。如果继续加入碳酸试液使其呈碱性，就会变成紫蓝色，证明其中含有花青素。
在盐酸存在下，黄酮类化合物的乙醇溶液可被镁粉还原生成花色苷并呈红色或紫色反应(个别为淡黄色、橙色、紫色或蓝色)。这是因为酮类化合物的分子中含有一个碱性氧原子，可溶于稀酸中还原成四价氧原子，即锌盐。这种方法是一种鉴别黄酮类化合物的反应。但花色素本身在酸性下是红色的(不加镁粉)，要加以区分。
注(1)这种增透仅在化学结构上，三位羟基的酮醇显色明显，其他黄酮酮类不明显。所以不能在检测为阴性的情况下做出否定的结论，需要结合其他实验才能做出结论。②试验应在酒精中进行，水分多会影响颜色形成。这个反应比较慢，有时需要水浴加热来促进反应。
(2)荧光测试:
①三氯化铝试验:将样品的乙醇溶液点于滤纸上(干燥后点1次，使其浓度适中)，干燥后喷1%三氯化铝乙醇试液，紫外灯下观察，呈黄色、绿色、橙色等荧光为黄酮类；显示天蓝色或黄绿色；荧光，是二氢黄酮。这是一个鉴别二氢黄酮的鉴别反应。
②硼酸丙酮柠檬酸丙酮试验:取1ml样品的乙醇溶液，蒸发加入0.5ml饱和硼酸丙酮溶液和0.5ml 10%柠檬酸丙酮溶液，在紫外灯下观察。试管显示强烈的绿色荧光(黄酮或其糖苷)。
(3)碱性溶液试验:取供试品的乙醇溶液，点于滤纸上(干燥后，再次点以浓缩其溶液)。干燥后，喷入1%碳酸钠溶液或在氨蒸气中熏几分钟，呈亮黄色、绿色或橙黄色。比如氨气熏过的滤纸暴露在空气中，颜色会逐渐褪色，变成原来的颜色(黄酮类或苷类)。
5.生物碱类
(1)沉淀反应-碘化钾汞试剂→白色或淡黄色沉淀
碘化铋钾试剂→橙色沉淀
碘-碘化钾试剂→浅棕色或深棕色沉淀
硅钨酸试剂→淡黄色或黄褐色沉淀
磷钨酸试剂→淡黄色沉淀
磷钼酸试剂→白色或淡黄色沉淀
苦味酸试剂→黄色结晶或无定形沉淀
单宁酸试剂→棕黄色沉淀
氯化金试剂→黄色结晶
氯化铂试剂→白色结晶
红色铵盐→红色无定形沉淀
(2) TLC检查:吸收剂-碱性氧化铝(ⅲ级，干铺)
硅胶g(稀碱湿铺)
展开剂-氯仿:甲醇
显色-紫外线；碘化铋钾
6.有机酸
(1)PH试纸检验
(2)溴酚蓝试液:喷雾→蓝色背景上的黄色斑点。
(3)薄层色谱检查:吸附剂-硅胶G或酸性氧化铝。
展开剂—— C6H6:乙醇
显色试剂-0.1%溴酚蓝试液→黄色
7.类固醇
(1)利伯曼-伯查德反应:+乙酸酐-浓硫酸→黄色-红色-紫色-污绿色。
(2)氯仿-浓硫酸反应:+氯仿-浓硫酸氯仿层→红色或青色。
硫酸层→绿色荧光
(3)五氯化锑或三氯化锑的反应:+SbCl3或SbCl5 →红色。
(4)薄层色谱检查:吸收剂-中性氧化铝或硅胶g
展开剂-c6h 6-MeOH；氯仿甲醇
显色剂-10%磷钼酸→蓝-蓝紫色
5%三氯化锑试液→红色、棕红色或绿色
9、香豆素、内酯
(1)开闭环反应:+1%NaOH→澄清+2%HCl→混浊。
(2)氢氧酸铁的反应:+7%盐酸羟胺，10% KOH△+稀HCl，1%FeCl3 →红色。
(3)重氮盐试剂:+对硝基苯胺，亚硝酸钠→红色。
(4)薄层色谱检查:吸附剂-酸性硅胶G或硅胶G或酸性氧化铝。
展开剂-甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5: 4: 1)
显色剂-紫外→蓝色荧光
铁氢氧酸盐测试溶液→红色
10，强心苷
(1)凯德试剂:+3，5-二硝基苯甲酸试液→紫红色
(2)巴尔杰试剂:+碱性苦味酸试液→橙色或橙红色。
(3)法定试剂:+亚硝酰铁氰化钠试液→紫红色。
(4)K-K反应:+FeCl _ 3/冰HAc，浓H2SO4→上绿~蓝(2-脱氧糖)
界面红棕色
(5)薄层色谱检查:吸附剂-硅胶G或中性氧化铝。
展开剂:正丁醇:醋酸:H2O (4: 1: 5)
显色剂-碱性3，5-二硝基苯甲酸试液→紫红色
碱性苦味酸试液→橙红色
11，蒽醌
(1)碱性溶液反应:+10%NaOH →红色+H2O2 →红色不褪色+H+ →红色褪色。
(2)醋酸镁反应:+1%MgAc2 →红色。
(3)薄层色谱检查:吸附剂-硅胶g
显影剂-pet:乙酸乙酯
显色剂-紫外→黄色荧光
5%氢氧化钠→红色
12，挥发性油，油脂
(1)油斑检查:油斑挥发→挥发油；油斑不消失→油脂或脂质。
(2)磷钼酸反应:喷5%磷钼酸试液→蓝色(油、三萜、甾醇)
最后，需要特别提醒的是，以上试剂的配制方法最好参考药典。第一个原因是写的很详细，第二个原因是药典里有规定，药典里配制的溶液如果用乙醇，如果没有规定无水乙醇，一般用95%的乙醇。
此外，附上试剂匹配方法:
氯化钠明胶试剂:(两者都是固体，刚开始真的不知道怎么混，后来在药典上找到了配方)现在需要准备2g氯化钠和1g明胶，加上100g水！