活性成分总黄酮的提取方法有哪些?

总黄酮的提取方法

1,通量法

热水提取、碱水或碱性稀醇提取、有机溶剂提取2、

2.微波提取法

微波萃取是利用不同结构的物质在微波场中微波吸收能力的差异,使基质中的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热,使被萃取的物质从基质或体系中分离出来,进入介电常数小、微波吸收能力相对较差的萃取剂中[1]。该方法的优点是选择性高、提取率高、提取速度快、溶剂消耗少、安全节能、设备简单[2]。2.2超声波提取法

超声波提取黄酮类化合物是目前比较新的方法。原理是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成分的提取,利用机械振动、扩散、粉碎等次生效应加速提取成分的扩散和释放。超声波提取法设备简单,操作方便,提取时间短,得率高,无需加热,有利于保护热不稳定成分,省时节能,提取率高。

3.超临界流体萃取

超临界流体萃取技术是利用超临界流体在临界温度和压力以上,具有气体和液体的双重特性,对物质具有良好的溶解性,以此作为溶剂进行萃取分离。有许多物质可以用作超临界流体,一般是低分子量化合物,如CO2、C2H6、NH3、N2O等。目前常用CO2作为萃取剂,因为它具有密度高、溶解性强、临界压力适中、临界温度接近常温、不影响提取物的生理活性、无毒无味、化学性质稳定、生产过程中易于回收、无环境污染、价格低廉等一系列优点。而单一CO2作为萃取剂只对低极性和亲脂性化合物有较强的溶解性,对大部分强极性组分没有影响。因此,向其中加入夹带剂是通过影响溶剂的密度和溶质与夹带剂分子之间的作用力来影响溶质在二氧化碳流体中的溶解度和选择性[15]。超临界流体萃取技术具有许多传统分离技术无法比拟的优势:过程易于控制,达到平衡的时间短,萃取效率高,无有机溶剂残留,不易破坏热敏性物质[16]。但它需要大型设备,技术要求高,投资大,对安全操作要求高,很难用于大规模生产。

4.酶提取

酶水解适用于被细胞壁包围的黄酮类化合物,利用酶反应的高度专一性破坏细胞壁,从中释放黄酮类化合物。黄剑波等人[22]采用纤维素酶辅助的方法从甜茶中提取黄酮类化合物。黄酮类化合物的提取率为91%,提取纯度为54%。王跃等[23]用游离酶、固定化酶和常规方法提取桔皮细胞,黄酮得率分别为65438±0.43%、0.94%和0.79%。与传统方法相比,游离酶法黄酮得率提高了865438±0%。

5.双水相萃取法

双水相萃取是瑞典Per Albersson首先发现并研究的技术。双水相萃取属于液-液萃取。当一种物质进入双水相体系时,由于表面性质、电荷和各种力的影响,在上下两相中的浓度不同,即组分在两相之间选择性分配,从而达到萃取的目的。双水相体系具有快速分相、低温、易操作、无污染、提取率高等优点,是富集分离黄酮类化合物的有效方法。张春秀等[24]取一定量的银杏叶提取物,加入到PEG1500/磷酸盐体系的双水相体系中,黄酮类化合物进入上相PEG,从而分离出黄酮类化合物,提取率可达98.2%。

6.半仿生提取法

半仿生提取法是针对经消化道给药的中药制剂而设计的一种新型提取技术,将整体药物研究与分子药物研究相结合,模拟药物口服后经胃肠道转运的环境。这种提取方法的特点是能提取和保留更多的有效成分,缩短生产周期,降低成本。

7.膜分离法

膜分离方法主要有超滤、微滤、纳滤和反渗透,其中超滤是膜分离的代表,是唯一可用于分子分离的过滤方法。它采用多孔半透膜作为分离介质,依靠膜两侧的压力差作为驱动力来分离溶液中不同分子量的物质。由于大部分黄酮类化合物的分子量在1000以下,大部分多糖、蛋白质等无效成分的分子量在50000以上,超滤可以有效去除蛋白质、多肽、大分子色素、淀粉等。达到杀菌、除热原、提高药液澄明度、增加有效成分含量的目的。该方法操作简单,无需加热,不破坏黄酮类化合物,提取效果好,超滤装置可重复使用。于涛等[26]研究了银杏叶黄酮的提取工艺和技术,采用超滤技术对粗品进行精制,并考察了影响超滤的工艺条件。超滤后,产品中黄酮含量达到33.99%。

8、热压流体萃取法

热压流体萃取是一种快速、环保、廉价、有效的提取生物活性物质的方法。陈朝瑞等[27]采用热压流体萃取法从巴西蜂胶中提取了7种黄酮类化合物。结果表明,热压水提取样品中存在表面活性剂时,提取物固形物含量较高,热压脂溶性提取物中7种黄酮类化合物的含量超过水溶性提取物。KairHartonen等人[28]采用热压水提法从银白杨中提取黄酮类化合物,考察了提取时间、温度和压力的影响,并与超声波提取法和高速逆流色谱法进行了比较。结果表明,150℃热水浸提法提取35min有效果实的效果最好。

2.9高压液体提取法

张颖等[29]采用高压液相提取法从鱼腥草中提取黄酮类化合物,研究了乙醇浓度、流速、温度和压力的影响,并与热浸法和超声波辅助提取法进行比较,发现高压液相提取法较好,当乙醇浓度为50%,溶剂流速为1.8mL/min,温度为70℃,压力为8MPa。