药物分析指南:黄连上清丸的含量测定方法

黄连上清丸的处方为:黄连10g、栀子(姜制)80g、连翘80g、蔓荆子(炒)80g、防风40g、荆芥80g、白芷80g、黄芩80g、菊花150g、薄荷40g、大黄(酒炒)320g、黄柏(酒炒)。

中国药典2005年版黄连上清丸含量测定项下:

色谱条件及系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈-0.003mol/l磷酸二氢钾溶液(35: 65)。检测波长为424nm。以盐酸小檗碱峰计算，理论板数应不低于4000。

供试品溶液的制备:取本品水丸或蜜丸，研细，取0.6g，精密称定；或取重量差的蜜丸，切成片，取1g，准确称取，置于带塞锥形瓶中，准确加入10ml盐酸和甲醇的混合溶液(1: 100)，塞紧，称取，250w℃水浴加热65438+。再次称量，用甲醇补足失重，摇匀，离心，过滤，精密量取上清液2ml，低温蒸发，残渣用适量甲醇溶解，转移至碱性氧化铝柱层析(8g，内径1cm，干柱装)，用35ml甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干。

以栀子苷和黄芩苷为指标:

李莉等用高效液相色谱法测定黄连上清丸中栀子苷的含量。仪器:岛津lc-6a高效液相色谱仪；色谱柱为spherisorb c18柱(4.6× 300mm，5微米)；流动相:甲醇-乙腈-0.1%磷酸水溶液(25: 5: 70)，流速0.5ml/min，纸速1mm/min，柱温30℃，检测波长240nm。用水超声处理后，样品用大孔树脂纯化。

hplc法测定黄连上清丸中黄芩苷的含量。流动相:甲醇-0.05m醋酸铵(40: 60)，pH = 3；Shimpack-clc-dds柱(150mm×6mm)；检测波长为275纳米；；流量为1毫升/分钟。样品用45%甲醇超声处理。

采用高效液相色谱法同时测定黄连上清丸中大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量。仪器:岛津lc-6a高效液相色谱仪；色谱柱spherisorb c 18(4.6mm×300mm)。流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液(90: 10)，流速0.6ml/min，检测波长254nm，柱温45℃。样品用氯仿提取。

反相高效液相色谱法测定黄连上清丸中黄芩苷的含量。色谱柱:ODS(4.6mm×200mm)；流动相:甲醇-水-冰醋酸(40:60:1)；流量为1.0毫升/分钟；柱温为30℃。样品用50%甲醇超声处理。