抗肝纤维化天然活性成分的筛选方法

目的:基于均匀设计法筛选并验证具有抗肝纤维化作用的丹酚酸B、红景天苷和青蒿琥酯的最佳配伍剂量。方法:雄性C57BL/6J小鼠腹腔注射15%四氯化碳6周，诱导肝纤维化模型。* * *设置了八种处方。从造模第2周开始，各组小鼠给予相应剂量的处方溶液，持续5周。末次给药后，检测血清丙氨酸氨基转移酶水平和肝脏羟丙基氨基酸含量，天狼猩红染色后光镜下观察肝组织形态学变化。以肝脏中羟脯氨酸含量为主要指标，采用NOMEN法分析最佳配方配比。根据ALT、Hyp和病理变化，筛选出疗效最好的处方。②验证实验:以扶正化瘀方为阳性对照药，对筛选出的处方进行验证。通过均匀设计和分析得出最佳处方为1。公式2是我们前期研究的经验公式，即丹酚酸B(17.5 mg/kg)+红景天苷(610 mg/kg)+青蒿琥酯(79mg/kg)；配方3是筛选实验中的最佳配方。建模和干预方法同前。末次给药后，检测血清ALT、ast和肝脏Hyp含量。HE染色和天狼猩红染色后，光镜下观察肝组织形态学变化，比较各组肝纤维化程度。结果:①筛选实验:均匀设计筛选的最佳处方配比为红景天苷(610 mg。丹酚酸B(14 mg/kg)+红景天苷(610 mg/kg)+青蒿琥酯(46 mg/kg)的抗肝纤维化作用最显著，能显著降低血清ALT水平和肝脏Hyp含量(P < 0.01)。②验证实验:丹酚酸B(14 mg/kg)+红景天苷(610 mg/kg)+青蒿琥酯(46 mg/kg)三组血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平及肝脏羟脯氨酸含量均明显低于模型组(P < 0.05，P < 0 . 05)，肝细胞变性、坏死、出血、纤维化、胶原沉积及炎性浸润等病理变化明显减轻，胶原沉积分期明显改善，胶原沉积所占比例明显降低结论:丹酚酸B(14 mg/kg)+红景天苷(665438)。