从红豆杉中提取紫杉醇有哪些方法?
(1)紫杉醇的生物合成;
紫杉醇的分子式为C47H51NO14,是一种具有萜类环状结构的天然次生代谢产物。主要由紫杉烷环和侧链组成。研究其生物合成对提高合成效率和克隆组合、形成关键酶基因、提高紫杉醇产量具有重要意义。目前关键是能不能找到一两个关键酶,能不能提纯克隆它们的基因。红豆杉基因的克隆能否突破还有待观察,但人们找到的想象途径还处于实验室阶段。
(2)紫杉醇的化学合成
据研究和报道,从红豆杉植物中分离的10-脱乙酰基浆果赤霉素ⅲ(Baccatinⅲ)活性明显低于紫杉醇,但可以从红豆杉针叶中提取。这种物质可以通过四个化学过程合成紫杉醇。在解决紫杉醇新来源方面取得了很大进展。NICOLAOU博士领导的美国研究小组在1994中报道了化学方法全合成紫杉醇的结果。但是化学合成本质上并没有完全突破,目前没有应用价值。
(2)紫杉醇的微生物合成
STTERLE等人从短叶红豆杉韧皮部分离出一种寄生真菌(Taxomyces andarea),该真菌在特定培养基中能产生紫杉醇及相关的碳氢化合物,但目前产量极低,不能用于生产。重组DNA技术有望提高紫杉醇的产量。
还发现除树皮外,根是紫杉醇含量最高的器官。人们用发根农杆菌浸泡红豆杉植物的外植体来诱导生根。这种方法不需要外源激素,发根生长迅速,遗传性状稳定,因此受到重视。如果能把寻找合成紫杉醇或其类似衍生物的方法、微生物合成获得的关键酶和克隆红豆杉相关基因结合起来,就能在这一方法上有所突破。
随着第五届北京生物医药发展论坛的介绍,从植物中提取紫杉醇的一般发展过程如下:
自20世纪60年代以来,抗癌新药的发现主要来自原始植物的代谢产物,即目前使用的几种抗癌化疗试剂,它们并不是从高等植物中提取的化合物。
例如从长春花中分离出的“长春花生物碱”。
从鬼臼中分离出的“表鬼臼毒素”衍生物。
从喜树中分离的喜树碱衍生物
至此,从红豆杉中分离出的“红豆杉二柱”成分已经获得。
提取紫杉醇的相关技术和设备;
1.从红豆杉中提取紫杉醇的关键技术及相关数据。
2.紫杉醇含量的精密测定方法、质量标准及相关数据。
3.除杂和超净设备。
4.高压液相色谱和液相色谱分析柱等。