阿魏酸的测定方法

用途:本方法采用高效液相色谱法测定制剂中阿魏酸的含量。

该方法适用于中药制剂急支糖浆。

方法原理:水浴蒸干样品，加入甲醇热回流提取，过滤，蒸发滤液，残渣溶于水，用稀盐酸调节pH至1 ~ 2，煮沸，冷却，转移至分液漏斗，用乙醚提取，用2%碳酸钠提取乙醚提取液，用乙酸乙酯洗涤碳酸钠提取液，弃去洗涤液，用稀盐酸调节碱液pH至65438+。将残余物溶解在甲醇中，过滤，通过高效液相色谱分离滤液。用紫外吸收检测器在323nm波长处检测阿魏酸的吸收值，计算其含量。

试剂:1。甲醇(色谱纯)

2.乙酸

3.醚

4.碳酸钠

5.盐酸

仪器设备:1。工具

1.1高效液相色谱仪

1.2色谱柱

Shim-Pack CLC-ODS分析柱(150×4.6mm，5μm)，理论塔板数按阿魏酸峰计算为4000。

1.3紫外吸收检测器

2.色谱条件

2.1流动相:甲醇1%醋酸水= 28 72。

2.2检测波长:323纳米

2.3柱温:室温

样品制备:1。称量测试样品。

准确吸取25毫升本品。

2.参考溶液的制备

准确称取阿魏酸对照品30mg，置于50mL容量瓶中，加甲醇溶解，加至刻度，混匀。准确吸取5mL于50mL容量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，得对照溶液。

3.测试溶液的制备

将试样水浴蒸至近干，加入甲醇，加热回流2次，每次50毫升，回流30分钟，过滤，蒸发滤液，加入40毫升水溶解残渣，用稀盐酸调节pH至1 ~ 2，煮沸，冷却，转移至分液漏斗，用乙醚20，10，65448+00。将10，10，10mL提取4次，合并提取液，用25mL乙酸乙酯洗涤，弃去洗涤液，用稀盐酸调节碱溶液pH至1 ~ 2，用乙醚20，10，65438+。

注:“精确称量”是指称量应精确到所取重量的千分之一。“精密测量”是指测量体积的精度应满足国家标准中体积移液管的精度要求。

操作步骤:1。绘制标准曲线。

准确吸取上述对照溶液4，8，12，16，20μL，注入高效液相色谱仪。用紫外吸收检测器在323nm波长处测定阿魏酸的吸收值，根据样品量绘制标准曲线与峰面积的关系，通过线性回归得到回归方程。

2.试验品的测定

准确吸取10μL试验溶液，注入高效液相色谱仪。用紫外吸收检测器，在323nm波长处测定阿魏酸的吸收值，并计算其含量。